植物组织培养的具体步骤

1、取材（外植体的选择）

组织培养获得成功的植物，几乎包括了植物体的各个部位，如：茎尖、茎段、皮层及维管组织、髓细胞、表皮、块茎的贮藏薄壁细胞、花瓣、根、叶、子叶、鳞茎、胚珠和花药等。但各个部位的诱导分化的成功率一般不同。另外取材季节、时间、器官的生理状态、外植体的大小对诱导都有影响。

2 、消毒灭菌

一般将所取的材料先经过自来水冲洗2~4h，再用75%酒精浸泡10~30s，无菌水冲洗2~3次，然后用2%~10%的NaClO溶液或0.1%HgCl浸泡10~15min，再用无菌水冲洗3~4次后方可接种。

3 、接种

在无菌条件下，用镊子或接种针将外植体置于培养基中，加盖封口膜培养。注意：每接种一次，最好将用具在酒精灯上灼烧，避免交叉感染。

4 、培养

通常的培养温度为25±2℃，光周期为12~16h光照，培养基的pH值为5.6~6.0，培养容器内的湿度一般为100%，培养室的湿度为70%~80%。由于培养基的成分不同又分为脱分化和再分化培养。

5 、炼苗及移栽

在试管苗移栽到田间前，一般要经过炼苗，从而提高移栽成活率。炼苗时间及方法视具体的材料而定。